詳細介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
貂源性成分(Martes)核酸檢測試劑盒進口 | 48T/盒 | 熒光-PCR法 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。產(chǎn)品僅用于科研
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
貂源性成分(Martes)核酸檢測試劑盒進口Integrin beta 6英文名稱:GPR77核苷二激酶A(NDPK-A)免疫試盒
INPP5F英文名稱:GDI1蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(Vtg)免疫試盒
IL-4I1英文名稱:GDPD1大腸桿宿主殘留蛋白(E.coli P)免疫試盒
IEX1英文名稱:GFPT2Zeranol(玉米赤)免疫試盒
ICAM4英文名稱:GABPATrenbolone(侖諾)免疫試盒
ITFG3英文名稱:GABPB2Sulphaquinoxaline(磺胺噁林)免疫試盒
IGF2BP1英文名稱:GAD65 + GAD67Sulphamethazine(磺胺二嘧啶)免疫試盒
IGF2BP2英文名稱:GADL1Sulphadiazine(磺胺嘧啶)免疫試盒CEP78英文名稱:Aspartate Aminotransferase兔子白介3(IL-3)免疫試盒
C6orf146英文名稱:ABCG5兔子白介2(IL-2)免疫試盒
C6ORF154英文名稱:ABCG8兔子白介1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)免疫試盒
C9orf16英文名稱:ACADL兔子白介1β (IL-1β)免疫試盒
C9orf78英文名稱:ACADM兔子白介1α(IL-1α)免疫試盒
C9orf79 英文名稱:ACADS兔子白介18(IL-18)免疫試盒
C9orf84英文名稱:ACOX1兔子白介13(IL-13)免疫試盒
C9orf85英文名稱:phospho-ASK1 (Ser1033)兔子白介11(IL-11)免疫試盒
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。產(chǎn)品僅用于科研
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術(shù)概論,。