詳細(xì)介紹
PCR基本操作:?
原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
新疆出血熱病毒(XHFV)核酸檢測試劑盒說明書 | 48T/盒 | 熒光-PCR法 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析,、基因表達(dá)差異分析,、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR產(chǎn)品僅用于科研
新疆出血熱病毒(XHFV)核酸檢測試劑盒說明書PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。產(chǎn)品僅用于科研
(2) 靈敏度高
產(chǎn)品僅用于科研PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位),;在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細(xì)胞,、活PCR技術(shù)概論,。
HAGH英文名稱:GLYR1植物維生D2(VD2)免疫試盒
phospho-HDAC5 (Ser498)英文名稱:GM2A植物維生D(VD)免疫試盒
HCMV/Cytomegalovirus Glycoprotein B英文名稱:GMDS植物維生C(VC)免疫試盒
Phospho-HDAC4 (Ser632) + HDAC5 (Ser498) + HDAC7 (Ser486)英文名稱:GMEB1植物維生B6(VB6)免疫試盒
Phospho-HER2 (Tyr877)英文名稱:GMEB2植物維生B12(VB12)免疫試盒
Phospho-HSL (Ser660)英文名稱:GMFG植物維生A(VA)免疫試盒
HURP英文名稱:GMP Synthase植物茄呢酶2,葉綠體(SPS2/SPPS)免疫試盒
Hrasls3英文名稱:GMPPB植物茄呢酶1(SPS1/SPPS/SPS)免疫試盒BIN3英文名稱:ALDH1A1豚鼠雌激(estrogen)免疫試盒
BOD1英文名稱:ARL3豚鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試盒
BRN3A英文名稱:15 Lipoxygenase 1豚鼠表皮生長因子(EGF)免疫試盒
BMP6英文名稱:ABC2豚鼠白三烯D4(LTD4)免疫試盒
BNP英文名稱:Alpha 1 microglobulin豚鼠白三烯B4(LTB4)免疫試盒
BMP3英文名稱:Alpha B Crystallin豚鼠白介8(IL-8)免疫試盒
Bag1英文名稱:ADORA2B豚鼠白介6(IL-6)免疫試盒
Brs3英文名稱:ARK5豚鼠白介5(IL-5)免疫試盒