詳細(xì)介紹
人原代肌源干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人原代肌源干細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代肌源干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人原代肌源干細(xì)胞的培養(yǎng),。
產(chǎn)品主要成分:
名稱(chēng) | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃,、避光 |
原代間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃,、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,,保存2個(gè)月,;-20℃,,避光,,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
EFHA1蛋白抗體 | 環(huán)指蛋白25抗體 |
酸化細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 | 唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體 |
周期素F抗體 | 人上皮細(xì)胞;Ca Ski |
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 | 精神分裂癥相關(guān)蛋白9抗體 |
酸化KB抑制蛋白激酶ε | DNA連接酶3抗體 |
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白 |
阿黑皮素原抗體 | CL-0124IMR-32(人母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
肝腸鈣粘連蛋白抗體 | 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1 |
一種腫瘤抑制基因抗體(C端) | HOS(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 非01群 |
真核翻譯起始因子3亞基L蛋白抗體 | NAMALWA(人Butt's淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
微管蛋白α/Tubulin α抗體 | HL-7702(人肝正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 人類(lèi)成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN |
CNPY4 Others Human 人 CNPY4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人原代肌源干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基CL-0403NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
HSF 人皮膚成纖維樣細(xì)胞 | Romas(人淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(體胚肺細(xì)胞) |
人類(lèi)成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1.使用人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,,避免污染,。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,,可以直接使用,。
3.為保持本人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,,超出保質(zhì)期,必須放棄使用,。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,,可能會(huì)有少量絮狀物析出,,不影響人原代肌源干細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。