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詳細(xì)介紹
人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃,、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃,，避光，保存2個(gè)月,；-20℃,，避光，保存6個(gè)月,。
1）復(fù)蘇人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí),。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱,，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
大腸桿菌脂多糖抗體 | 環(huán)指蛋白2抗體 |
8號(hào)染色體開放閱讀框84抗體 | 雌激素反應(yīng)鋅指蛋白抗體 |
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CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) | COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-29 人腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CD36 Others Human 人 CD36 / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
1.使用人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,，可以直接使用。
3.為保持本人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,，不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,，超出保質(zhì)期，必須放棄使用,。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,，可能會(huì)有少量絮狀物析出,，不影響人原代甲狀腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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