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詳細(xì)介紹
人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無(wú)需添加任何成分，可直接用于人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞的培養(yǎng),。
產(chǎn)品主要成分：
名稱(chēng) | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代腫瘤細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃,、避光 |
原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃,、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光,，保存2個(gè)月,；-20℃，避光,，保存6個(gè)月,。
1）復(fù)蘇人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱,，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體 | 環(huán)指蛋白32抗體 |
酸化P27抗體/周期素依賴(lài)激酶抑制劑抗體 | 雌激素受體α抗體 |
半胺酸蛋白酶蛋白-12抗體 | 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC |
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體 | 表面蛋白Sp17抗體 |
酸化NF-κB活化激酶抗體 | Wnt通路抑制因子2抗體 |
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3 肝癌細(xì)胞,，BEL-7404細(xì)胞 CEL細(xì)胞，雞胚原代肝細(xì)胞 | OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
癌/抗原113抗體 | CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
淋巴增強(qiáng)因子-1抗體 | A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)因子Reg IIIγ抗體 | 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I 淋巴瘤細(xì)胞,，EL4. IL-2細(xì)胞 K6H6/B5細(xì)胞,，鼠雜交骨髓瘤細(xì)胞 |
干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白2抗體 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14 小鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
微管蛋白聚合促進(jìn)蛋白24 | Colo205細(xì)胞，人結(jié)腸癌細(xì)胞 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞,A-204細(xì)胞 人正常肝細(xì)胞;L-02 |
ASGR1 Others Mouse 小鼠 ASGPR1 / ASGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 |
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞RNAHHSEC miRNA5 μg | RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細(xì)胞) |
P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1.使用人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,，避免污染,。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,，可以直接使用,。
3.為保持本人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,，超出保質(zhì)期,，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,，不可應(yīng)用于臨床等其他方面,。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出,，不影響人原代膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用,。
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