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詳細(xì)介紹
人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng),。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃,、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃,，避光,，保存2個(gè)月；-20℃,，避光,，保存6個(gè)月,。
1）復(fù)蘇人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí),。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱,，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,，避免污染,。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,，可以直接使用,。
3.為保持本人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,，超出保質(zhì)期，必須放棄使用,。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,，可能會(huì)有少量絮狀物析出,，不影響人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
酸化真核翻譯起始因子4G抗體 | 環(huán)指蛋白40抗體 |
碳酸酶9抗體 | 雌激素受體相關(guān)蛋白α抗體 |
鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體 | 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2B |
ANGEL1蛋白抗體 | 尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體 |
酸化p21激活激酶1/2抗體 | 抗菌蛋白DCD抗體 |
AGS細(xì)胞,，胃腺癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,TU 686細(xì)胞 大鼠垂體瘤細(xì)胞;MMQ | 人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1 |
癌基因蛋白抑瘤素M抗體 | CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體 | FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體 | CCD-1095Sk細(xì)胞,，皮膚細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HHCC細(xì)胞 CL-0176OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
胰島素生長(zhǎng)因子樣家族成員1抗體 | SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS |
微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 | 人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4 大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HAVCR1 Others Human 人 TIM1 / KIM1 / HAVCR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 人原代結(jié)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基MKN45(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞HIBEpiC | EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 ) MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Mouse |
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