詳細(xì)介紹
人原代卵巢成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代卵巢成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代卵巢成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于人原代卵巢成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃,、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃,、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,,保存2個月,;-20℃,避光,,保存6個月,。
1)復(fù)蘇人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 | 環(huán)指蛋白59抗體 |
細(xì)胞色素P450 2R1抗體 | 促代謝型谷受體1+5抗體 |
脫羧酶蛋白體36抗體 | 人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟總RNAHPA-v NA |
β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體 | 痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體 |
酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 | 酸化B淋巴細(xì)胞銜接分子DAPP1抗體 |
OMG Others Mouse 小鼠 OMG / OMGP (aa 1-245) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1抗體 | CL-0090Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
MD-2蛋白抗體 | ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
胰島素受體α抗體 | UBA1 Others Human 人 UBE1 / UBA1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Anti-IER5 | AFP Others Human 人 AFP / alpha-fetoprotein 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
微管相關(guān)蛋白EB家族3抗體 | CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2C 大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 人原代卵巢成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基大鼠牙細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞;MGC803-GFP | SkMC Pellet 人骨骼肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞cDNAHHGMC cDNA |
CD14 Others Mouse 小鼠 CD14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9401 人血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
1.使用人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染,。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用,。
3.為保持本人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,,超出保質(zhì)期,,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,,不可應(yīng)用于臨床等其他方面,。
6.培養(yǎng)基凍融后,,可能會有少量絮狀物析出,,不影響人原代卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。