詳細(xì)介紹
人原代腮腺細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持人原代腮腺細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代腮腺細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于人原代腮腺細(xì)胞的培養(yǎng),。
產(chǎn)品主要成分:
名稱(chēng) | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃,、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,,保存2個(gè)月,;-20℃,避光,,保存6個(gè)月,。
1)復(fù)蘇人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi),;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
內(nèi)皮細(xì)胞的分化蛋白6抗體 | 磺氨基葡糖硫酸胺酶抗體 |
心肌特異性肌鈣蛋白T抗體 | 促卵泡刺激素抗體 |
細(xì)胞色素P450Ⅱj3抗體 | 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUVEC cDNA |
腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 | 聚組抗體g標(biāo)簽抗體(C端) |
酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體 | 三酸腺苷依賴(lài)解旋酶DDX23抗體 |
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重組野豬 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 |
八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子6抗體 | CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
富含亮重復(fù)家庭蛋白3抗體 | 野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d |
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白9抗體 | IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
整合素αVβ1抗體 | PRSS8 Others Mouse 小鼠 Prostasin / PRSS8 (aa 30-289) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
維甲酸誘導(dǎo)蛋白3抗體 | PGF Others Mouse 小鼠 PIGF / PLGF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 | 人原代腮腺細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基人牙齦成纖維細(xì)胞RNAHGF miRNA5 μg |
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E | SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 V79(中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) |
A2(人腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16 | CST3 Others Mouse 小鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1.使用人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,,可以直接使用。
3.為保持本人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,,必須放棄使用,。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面,。
6.培養(yǎng)基凍融后,,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響人原代腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用,。