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猴胎腎細(xì)胞;MARC145/Gal-8培養(yǎng)

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更新時(shí)間:2018-05-08 16:18:06瀏覽次數(shù):384

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

猴胎腎細(xì)胞,;MARC145/Gal-8培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床,。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞,、耐藥細(xì)胞株,。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,,光澤度好,,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),。歡迎廣大科研用戶,!

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱  猴胎腎細(xì)胞;MARC145/Gal-8培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1:

3傳代,3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測(cè) 陰性 

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定
猴胎腎細(xì)胞,;MARC145/Gal-8培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),,晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),,按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,,加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-CRP/Biotin 生物素化C-反應(yīng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-L-enk/FITC 熒光素標(biāo)記抗亮氨酸腦啡肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCDC127 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體 規(guī)格 0.2ml

GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原 0.5mg

HDX 英文名稱: 高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SLN/Sarcolipin 肌脂蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-L-enk/FITC 熒光素標(biāo)記抗亮氨酸腦啡肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
INH-B(Human inhibin B) ELISA Kit 人抑制素BMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-laminin 層粘連蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh KLHL24 Kelch樣蛋白24抗體 規(guī)格 0.2ml

IFN- Beta/IFNB ELISA Kit 大鼠β干擾素 96T

P2Y4 英文名稱: P2Y4受體抗體 0.1ml

c20orf72 英文名稱: 20號(hào)染色體開放閱讀框72抗體 0.2ml

Anti-laminin 層粘連蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml

GNB5 英文名稱: G蛋白β5/Gβ 5 抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AMBRA1 自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Jun D/FITC 熒光素標(biāo)記活化蛋白激酶D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-SHIP2 (Ser576) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-MMP-11 基質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Integrin beta 3/CD61 整合素β3抗體 規(guī)格 0.1ml

EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM 96T

Proteasome 20S alpha 2 英文名稱: 蛋白酶體PSMα2抗體 0.2ml

C7orf59 英文名稱: 7號(hào)染色體開放閱讀框59抗體 0.2ml

Anti-MMP-11 基質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造,。

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