詳細介紹
雪羊皮膚細胞,;SSHS1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。
細胞名稱 雪羊皮膚細胞,;SSHS1價格
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性雪羊的耳組織。1997年由中科院昆明細胞庫建立,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
2傳代,;3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,,按公式計算出細胞數,。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化,、計數已貼壁細胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,,計數每孔細胞的數目并計算平均值,。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-EGFRvIII/FITC 熒光素標記表皮生長因子受體III型突變體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-MYL2 (Ser19) /FITC 熒光素標記磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C2orf68 2號染色體開放閱讀框68抗體 規(guī)格 0.2ml
CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A) 細胞表面趨化因子受體2A抗原 0.5mg
Haspin 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SAMHD1/HDDC1/MOP5 單核細胞蛋白5抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Phospho-MYL2 (Ser19) /FITC 熒光素標記磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LBP ELISA Kit 大鼠脂多糖結合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TFF2 三葉肽因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Bovine IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的羊抗IgG 規(guī)格 0.1ml
TALLA-1/CD231(Human T-cell acute lymphoblastic leukemia antigen) ELISA Kit 人T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原 96T
Natrexone 英文名稱: 納曲酮抗體IgG 0.2ml
BIN1 英文名稱: 橋連整合因子蛋白抗體 0.1ml
Anti-TFF2 三葉肽因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗猴IgG 0.1ml
GARS 英文名稱: X連鎖Charcot-Marie-Tooth變相關蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Angiotensin II type 1A receptor 血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-IRS1(Ser332/336)/FITC 熒光素標記磷酸化胰島素受體底物-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗馬IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-Sema6A/FITC 熒光素標記抗Sema6A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NT-proBNP(Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide) ELISA KIT 人N端前腦鈉素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-URG4 上調基因4抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mitofilin/IMMT 線粒體內膜蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色素異構酶 96T
Retinoid X receptor 英文名稱: 核受體RXRα抗體 0.1ml
CHD3 英文名稱: 染色質解旋酶DNA結合蛋白3抗體 0.1ml
Anti-URG4 上調基因4抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml