詳細介紹
細胞名稱 兔間變表皮鱗癌瘤株,;VX2培養(yǎng)
形態(tài)特性 實體瘤
品牌 體內(nèi)生長
特征特性 可在兔皮下,、肌肉,、肝臟、肺等部位移植,,100%成瘤,。皮下或肌肉移植100%肺轉(zhuǎn)移。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細胞懸液接種至大耳白等兔,。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權限 A類
兔間變表皮鱗癌瘤株,;VX2培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮,、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細胞生長曲線
Anti-CT-1/CTF1/FITC 熒光素標記心肌營養(yǎng)素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-lamin B/FITC 熒光素標記核纖層蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CCDC112/MBC1 膀胱癌突變蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原 0.5mg
HAI-1 英文名稱: 肝細胞生長因子激活物抑制劑抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 規(guī)格 0.1ml
Anti-lamin B/FITC 熒光素標記核纖層蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Lep IgG(Mouse Leptospira IgG) ELISA Kit 小鼠鉤端螺旋體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
anti-cath-B/CB/FITC 熒光素標記組織蛋白酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh eIF3H 真核翻譯起始因子3H抗體 規(guī)格 0.1ml
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53 96T
Mouse IgA 英文名稱: 兔抗小鼠IgA抗體 0.2ml
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 英文名稱: 磷酸化β抑制蛋白1抗體 0.1ml
anti-cath-B/CB/FITC 熒光素標記組織蛋白酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗猴IgM 0.1ml
phospho-GAB2 (Ser159) 英文名稱: 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD26 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Integrin AlphaE2/CD103 /FITC 熒光素標記整合素αE2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5 Cy5標記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC 熒光素標記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CCRK 細胞周期相關激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX3 配對盒基因3抗體 規(guī)格 0.1ml
DPP7 Kit Human 人 DPP7 / DPPII / DPP2 ELISA配對抗體 ELISA
Thrombin Activation peptide fragment 2 英文名稱: 凝血酶(凝血因子II)激活肽2抗體 0.1ml
CPLA2 英文名稱: 胞漿型磷脂酶A2抗體 0.2ml
Anti-CCRK 細胞周期相關激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。