詳細介紹
犬細支氣管上皮細胞,;CBE1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細胞名稱 犬細支氣管上皮細胞,;CBE1價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓,、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細胞生長曲線
Anti-E.coli DH-5 Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標記抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Mre11/HNGS1/FITC 熒光素標記DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C20orf112 20號染色體開放閱讀框112抗體 規(guī)格 0.2ml
CASP4(Caspase-4) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗原 0.5mg
HADHB 英文名稱: 羥輔酶A脫氫酶β抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh S-100/S100A1 S100A1抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Mre11/HNGS1/FITC 熒光素標記DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Leptin 瘦素(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD2 CD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAI-2/SerpinB2 纖溶酶原激活物抑制因子2抗體(血漿酶原激活酶抑制因子-2) 規(guī)格 0.1ml
COQ7 Kit Human 人 COQ7 ELISA配對抗體 ELISA
Tsg101 英文名稱: 易感基因101蛋白抗體 0.1ml
C6orf150 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框150抗體 0.1ml
Anti-CD2 CD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG 兔抗小鼠IgG 1mg
FGFR4 英文名稱: 成纖維細胞生長因子受體4抗體 0.1ml
熱休克蛋白-70抗體 Anti-HSP-70 0.1ml
Anti-PLGF/FITC 熒光素標記小鼠胎盤生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Rb(Ser795) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG Whole serum 羊抗IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗人絨毛膜促性腺激素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGEA10 黑色素瘤相關(guān)抗原10抗體 規(guī)格 0.2ml
DPD(Human deoxypyridinoline) ELISA Kit 人脫氧酚/脫氧啉 96T
phospho-RAD9(Ser272) 英文名稱: 磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 0.1ml
CDKN1B 英文名稱: P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑 0.1ml
Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml