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詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 豚鼠皮膚細(xì)胞；GP-S3培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性豚鼠的皮膚組織,。2003年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：
2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
豚鼠皮膚細(xì)胞,；GP-S3培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時,，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
Anti-GCP-2/CXCL6 /FITC 熒光素標(biāo)記抗粒細(xì)胞趨化蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-RSK2 (Tyr529) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cathepsin K 組織蛋白酶K抗體 規(guī)格 0.1ml
FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細(xì)胞生長因子4抗原 0.5mg
H1N1 matrix protein 2 英文名稱： 甲型流感病毒M2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SLC25A13 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Phospho-RSK2 (Tyr529) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Lingo-1 Nogo受體作用蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr412) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 規(guī)格 0.1ml
HRP穩(wěn)定劑 10ml/100ml pH7.2，無蛋白成分
VPREB1 英文名稱： B淋巴細(xì)胞前體蛋白1抗體 0.2ml
phospho-Dnmt1(Ser732) 英文名稱： 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.1ml
Anti-AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.5ml
Golgin 97 英文名稱： 高爾基體蛋白97抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Integrin- Beta3/ITG- Beta3/CD61/FITC 熒光素標(biāo)記整合素-β3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-IFABP/FITC 熒光素標(biāo)記小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PKR/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶R/雙鏈RNA依賴蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSA 芳香基酯酶1抗體 規(guī)格 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GBP6 英文名稱： G蛋白結(jié)合蛋白6體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格 0.3ml
Anti-PKR/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶R/雙鏈RNA依賴蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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