化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞；BHK-21價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞,；BHK-21價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系是于1961年由Macpherson IA,、Stoker MGP建系，源自5只未辨性別的1天齡倉鼠腎,；可作為轉(zhuǎn)化宿主,；OIE組織將該細(xì)胞用于狂犬病的診斷。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：
3傳代,；3-4天一次
傳代情況 PN4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti- Beta-endorphin/FITC 熒光素標(biāo)記人,、大,、小鼠、羊,、beta內(nèi)啡肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MMP-17/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh C21orf70 21號染色體開放閱讀框70抗體 規(guī)格 0.2ml
cath-B/CB(Cathepsin B) 組織蛋白酶B抗原 0.5mg
H1N1 Matrix Protein 1 英文名稱： A型病毒H1N1蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh S100PBP/S100P binding protein S100P結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-MMP-17/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LIS1(Lissencephaly-1 protein) 無腦回的致病基因LIS1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-AIMP2 AIMP2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr283) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 規(guī)格 0.1ml
熒光抗體稀釋液 10ml pH 7.2,不能加入血清
Vitamin D Receptor/VDR 英文名稱： 維生素D3受體抗體 0.1ml
phospho-Dnmt1(Ser154) 英文名稱： 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.1ml
Anti-AIMP2 AIMP2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
GOSR1 英文名稱： 高爾基SNAP受體復(fù)合物1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AMY2A 胰腺α淀粉酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-ISR- Beta /FITC 熒光素標(biāo)記胰島素受體-β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.3ml
Anti-Shank1/FITC 熒光素標(biāo)記shank-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-IFITM1/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-PKR (Thr451) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶R抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARRDC4 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GBP1 英文名稱： G蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-PKR (Thr451) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶R抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
化工儀器網(wǎng)