詳細介紹
抗P24蛋白單抗雜交瘤細胞;8H1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 抗P24蛋白單抗雜交瘤細胞,;8H1價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生抗P24蛋白的單克隆抗體,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C30
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-MIP-3 Beta/ELC/CCL19/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細胞炎性蛋白3β 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光素標(biāo)記壞死因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACADM/MCAD ?;o酶A脫氫酶中鏈抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml
GPR84 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體84抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Avidin/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml
Anti-TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光素標(biāo)記壞死因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MBP/MBL (Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL) ELISA Kit Rat Mannma binding protein/mannan binding lectinMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-STAT3 (Thr705) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格 0.3ml
cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 小鼠環(huán)磷酸鳥苷 96T
NADPH oxidase 4 英文名稱: NADPH氧化酶NOX家族的成員4抗體 0.2ml
phospho-Bid (Ser61) 英文名稱: 磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 0.1ml
Anti-phospho-STAT3 (Thr705) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GDF8 英文名稱: 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APLP2 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-IL-12R Beta1/CD212/FITC 熒光素標(biāo)記白細胞介素-12受體β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human sIgA/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-PTEN (Ser380) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化抑制基因PTEN抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-ADRB3/ Beta3-AR /FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺素能受體β3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-ERK1/2/FITC 熒光素標(biāo)記原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CREB-1 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Diethylstilbestrol/KLH 己烯雌酚偶聯(lián)血藍蛋白 1mg
KLK6 英文名稱: 激肽釋放酶6抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh UGDH/UDPGDH 尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-ERK1/2/FITC 熒光素標(biāo)記原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml