人椎間盤髓核細胞*培養(yǎng)基懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
產(chǎn)品名稱：人椎間盤髓核細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格：500 ml

對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱,，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次,，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮,、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,，加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％,，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) /FITC 熒光素標記磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-TGF- Beta2 /FITC 熒光素標記轉移生長因子–β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADAM15 去整合素樣金屬蛋白酶15抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗雞IgG 0.1ml

GPR63 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體GPR63蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-TGF- Beta2 /FITC 熒光素標記轉移生長因子–β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MCP-1 人巨噬細胞趨化蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CRP C-反應蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NLGN4X 神經(jīng)元X連鎖蛋白抗體(兒童自閉癥相關蛋白) 規(guī)格 0.2ml

Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit 人膜輔蛋白 96T

TPD54 英文名稱： 蛋白D54蛋白抗體 0.2ml

CUTC 英文名稱： 銅轉運蛋白CUTC抗體 0.2ml

Anti-CRP C-反應蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit IgG/APC 熒光素APC標記兔IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml

LPPR4 英文名稱： 腦特異性磷脂酸磷酸酶樣蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh DIS3L 有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體 規(guī)格 0.2ml

MDA(Mouse malondialchehyche)ELISA Kit 小鼠丙二醛Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

馬杜霉素檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產(chǎn)/蜂蜜/奶

Anti-cofilin/FITC 熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠絲切蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit 人TH糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-P27 kip1 P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HURP/DAP5 肝癌上調蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

DHEA-S(Mouse Dehydroepiandrosterone sulfate)ELISA Kit 小鼠脫氫表雄酮酯 96T

Peroxiredoxin 2 英文名稱： 硫氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體 0.2ml

CCDC43 英文名稱： 卷曲螺旋結構域蛋白43抗體 0.2ml

Anti-P27 kip1 P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml