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詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞,；IIIE6價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞,；IIIE6價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C24
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT 小鼠腎損傷分子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔CD33L抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DUSP26/MKP8 雙特異性蛋白磷酸酶26抗體(原活化蛋白激酶磷酸酶8) 規(guī)格 0.2ml
COX IgG VI 柯薩奇病毒 IgG Ⅵ(間接法二步法)
GPR24 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 0.1ml
ACY3 英文名稱： 丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體 0.2ml
Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔CD33L抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CCR-3/FITC 熒光素標(biāo)記CC趨化因子受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ECT2 上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
cPLA2(Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 )ELISA Kit 大鼠胞漿型磷脂酶A2 96T
Meis homeobox 3 英文名稱： 同源盒蛋白MEIS3抗體 0.2ml
AMPK alpha 2 英文名稱： 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 0.1ml
Anti-CCR-3/FITC 熒光素標(biāo)記CC趨化因子受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
RAP1A (RAS-related protein-1a precursor) Rap1A抗原 0.2ml
IL-6 英文名稱： 白介素6抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh CDC40 細(xì)胞分裂周期同源蛋白40抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-CD9/MRP-1/FITC 熒光素標(biāo)記CD9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh TEP1 端粒酶相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-HMGA2/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TRAIL-R1 ELISA Kit 大鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Annexin VI/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 VI抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM98A FAM98A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
DAT ELISA Kit 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 96T
MVD 英文名稱： 甲羥戊酸脫羧酶抗體 0.1ml
ASAH2 英文名稱： ?；蚀济擋Ｃ?抗體 0.2ml
Anti-Annexin VI/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 VI抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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