詳細(xì)介紹
小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞株;10H4價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱 小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞株,;10H4價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),,晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),,按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,,加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-Integrin- Beta3/ITG- Beta3/CD61/FITC 熒光素標(biāo)記整合素-β3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.5ml
Golgin 97 英文名稱: 高爾基體蛋白97抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
mmp-2(Human) 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NKR/Neurokin B receptor 神經(jīng)激肽B受體抗體 規(guī)格 0.2ml
Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit 人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43 96T
TRH 英文名稱: 促甲狀腺素釋放激素抗體 0.1ml
CEP120 英文名稱: 中心體蛋白CEP120抗體 0.1ml
Anti-phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
RV 風(fēng)疹胞病毒 IgG(間接法二步法)
MTMR8 英文名稱: 肌管素相關(guān)蛋白8抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPOLA/DNA polymerase alpha DNA聚合酶α抗體 規(guī)格 0.2ml
SP(Mouse Substance P) ELISA Kit 小鼠P物質(zhì)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
AFP 英文名稱: 甲胎蛋白抗體 0.1ml
Anti-CEA/Biotin 生物素化癌胚抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Lumbrokinase 蚯蚓纖溶酶(蚓激酶抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-SLAMF9 CD2F-10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子抗體 規(guī)格 0.1ml
CST7 Kit Human 人 Cystatin F / CST7 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
Thymidylate synthase 英文名稱: 胸苷酸合成酶抗體 0.1ml
Cadherin 8 英文名稱: 鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml
Anti-SLAMF9 CD2F-10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml