雜交瘤細(xì)胞株；C12D1培養(yǎng)只能用于科研,，不得用于臨床,。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞,、耐藥細(xì)胞株,。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿,，光澤度好,，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),。歡迎廣大科研用戶,！

細(xì)胞名稱  雜交瘤細(xì)胞株；C12D1培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

品牌 懸浮生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開,。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代，3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定
雜交瘤細(xì)胞株,；C12D1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率,。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-IL-31RA/CRL3/FITC 熒光素標(biāo)記白介素31受體a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-RGS2/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Annexin A8 膜粘連蛋白8抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

GNRHR2 英文名稱： 促性腺素釋放激素受體2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-RGS2/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MMP-4 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、小鼠磷酸化Ack1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FGFR1OP/FOP 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1原癌基因伴侶蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

CYP450 ELISA Kit 大鼠細(xì)胞色素P450 96T

MCP-3 英文名稱： 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體 0.1ml

ACCN5 英文名稱： 小腸鈉通道蛋白5抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠磷酸化Ack1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

S100A10 英文名稱： S100鈣結(jié)合蛋白A10抗體 0.2ml

Eph receptor A2+A3+A4 英文名稱： 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪酸激酶A2+A3+A4抗體 0.2ml

平足蛋白抗體 Anti-Podoplanin Protein 0.1ml

Anti-STK/CK II Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記屬絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MST1R(Ser1349) 磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit 人α突觸核蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HIFPH4 缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化酶抗體 規(guī)格 0.2ml

CsA(Mouse Cyclosporine A) ELISA Kit 小鼠環(huán)孢素A 96T

Properdin 英文名稱： P因子/備解素抗體 0.1ml

CD161 英文名稱： CD161抗體 0.1ml

Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造,。