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詳細(xì)介紹
小鼠正常氣管上皮細(xì)胞,；MNTEC/HL-007價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 小鼠正常氣管上皮細(xì)胞,；MNTEC/HL-007價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長至60%～70%融合時,，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-phospho-IRS1(Tyr1222)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化胰島素受體底物-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Sema3A/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4 血管生成素3/血管生成素4抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
GNG11 英文名稱： G蛋白γ11/Gγ11 抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格 0.5ml
Anti-Sema3A/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse angiotension II ,ANG- II ELISA Kit 小鼠血管緊張素ⅡMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-BSEP/FITC 熒光素標(biāo)記膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EpCAM/CD326 上皮細(xì)胞粘附分子抗體 規(guī)格 0.1ml
TSC22 ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22 96T
phospho-MEF2C(Ser396) 英文名稱： 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 0.1ml
Aph-1b 英文名稱： 早老素穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌酶組件蛋白APH1抗體 0.2ml
Anti-BSEP/FITC 熒光素標(biāo)記膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SAA(Mouse Serum amyloid A)ELISA Kit 小鼠血清淀粉樣蛋白A 96T
SCA14 英文名稱： 蛋白激酶C亞型G抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh HLA G(C-terminal) 人類白細(xì)胞抗原G抗體(C端) 規(guī)格 0.1ml
C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白εMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
C10orf63 英文名稱： 10號染色體開放閱讀框63抗體 0.2ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771) 磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh P45017A1/Cytochrome P450 17A1 細(xì)胞色素C P450 17A1抗體 規(guī)格 0.1ml
CR2 Kit Human 人 CD21 ELISA配對抗體 ELISA
TBL1Y 英文名稱： 轉(zhuǎn)導(dǎo)β樣蛋白1抗體 0.2ml
C6orf64 英文名稱： 6號染色體開放閱讀框64抗體 0.2ml
Anti-Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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