詳細介紹
雜交瘤細胞株,;F3A2價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;F3A2價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Myosin Phosphatase/FITC 熒光素標記肌球蛋白磷酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TREML2/TLT2/FITC 熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCG2/CD338 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GNAI3 英文名稱: 抑制型G蛋白α3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-TREML2/TLT2/FITC 熒光素標記兔抗人、大,、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA Kit 小鼠癌胚抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD203c/FITC 熒光素標記CD203c抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ER α 雌激素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit 小鼠溶菌酶 96T
Phospho-Mst2(Thr180) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶MST2抗體 0.1ml
phospho-c-Abl (Tyr70) 英文名稱: 磷酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
Anti-CD203c/FITC 熒光素標記CD203c抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Salmonella typhimurium 英文名稱: 鼠傷寒沙門氏菌 0.2ml
phospho-EGFR (Tyr1172) 英文名稱: 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
骨橋蛋白抗體 Anti-OPN 0.1ml
Anti-Snail/FITC 熒光素標記抗Snail蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Ser1480) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml
C-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-GPC3/FITC 熒光素標記磷脂?;嫉鞍拙厶?3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-P38 MAPK/FITC 熒光素標記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
CR (Calretinin) 鈣結(jié)合蛋白(抗原) 0.5mg
Histone H1t 英文名稱: 組蛋白H1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RASA3 Ras-GTP酶激活蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-P38 MAPK/FITC 熒光素標記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml