詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞株,;NT4D12價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞株;NT4D12價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮,、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細胞生長曲線
Anti-KLF9/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Slc26a5/Prestin/FITC 熒光素標記外毛細胞運動蛋白/可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白Slc26a5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh alpha 2 Macroglobulin α2巨球蛋白(α-2M)抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/FITC FITC標記的兔抗人IgM 0.3ml
GMEB2 英文名稱: 糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-Slc26a5/Prestin/FITC 熒光素標記外毛細胞運動蛋白/可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白Slc26a5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit 小鼠CD3分子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BNP/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗人腦鈉素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Epsti1/Epithelial Stromal Interaction 1 上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Apo-E (Rabbit Apolipoprotein E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E 96T
phospho-MARK2(Thr596) 英文名稱: 磷酸化絲酸/蘇酸蛋白激酶MARK2抗體 0.1ml
BAF53b 英文名稱: 肌動蛋白樣蛋白6B抗體 0.2ml
Anti-BNP/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗人腦鈉素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SAP62 英文名稱: 剪接體相關蛋白62抗體 0.2ml
EIF2C 英文名稱: 真核翻譯起始因子2C1抗體 0.2ml
關節(jié)炎相關基因抗體 Anti-PADI4/PAD4 0.1ml
Anti-SPHK1/FITC 熒光素標記鞘氨醇激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKB1(Ser893) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Beta-EP(mouse Beta-Endorphin) ELISA Kit 小鼠β內(nèi)啡肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標記抗CD44抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Drebrin 腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
C-Peptide C-肽(夾心法二步法) 96T
MMP-15 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體 0.1ml
alpha 1 Antitrypsin 英文名稱: α-1抗胰蛋白酶抗體 0.1ml
Anti-CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標記抗CD44抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml