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詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞株,；4-C3價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株,；4-C3價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-ILT2/CD85j/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-RKIP/FITC 熒光素標(biāo)記Raf激酶抑制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ankyrin G 錨定蛋白G抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.3ml
GLUT10 英文名稱： 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-RKIP/FITC 熒光素標(biāo)記Raf激酶抑制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3) 多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD38 CD38抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PACAP R1 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
PCSK9 Kit Mouse 小鼠 PCSK9 ELISA配對抗體 ELISA
TNFAIP8L2 英文名稱： 壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2/TNFα-IP 8L2抗體 0.1ml
COL6A5 英文名稱： 6型膠原蛋白α5抗體 0.2ml
Anti-CD38 CD38抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SCN3B 英文名稱： 電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體 0.2ml
Ecat1 英文名稱： 胚胎干細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.1ml
血小板源性生長因子-B抗體 Anti-PDGF-B 0.1ml
Anti-SSB/La /FITC 熒光素標(biāo)記抗干燥癥SSB/La抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 規(guī)格 0.1ml
GAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷氨酸脫羧酶-65(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-DIO2/FITC 熒光素標(biāo)記脫碘酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MKK7/FITC 熒光素標(biāo)記原活化蛋白激酶MKK7IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cadherin 8 鈣粘附蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml
Collagen III (Anti--Collagen Type III ) Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原) 0.5mgAcetyl-Histone H2B(K20) 英文名稱： 乙酰化組蛋白H2B抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh SEPT1 細(xì)胞分化蛋白SEP1抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-MKK7/FITC 熒光素標(biāo)記原活化蛋白激酶MKK7IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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