詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞株,;3B7價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞株,;3B7價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-IL-16/FITC 熒光素標(biāo)記白介素16抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人分泌型IgA抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Apg12 自噬相關(guān)蛋白12抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.3ml
GIMAP6 英文名稱: GTP酶IMAP家族成員6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人分泌型IgA抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NF-κB p65 ELISA Kit 大鼠核因子κB亞基p65親和肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TTF-2 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GERP/TRIM8/RNF27 環(huán)指蛋白27抗體 規(guī)格 0.2ml
p2(Human myelin protein 2) ELISA Kit 人神經(jīng)髓鞘蛋白 96T
NYS48 英文名稱: NYS48蛋白抗體 0.2ml
ALS2CR3 英文名稱: 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
Anti-TTF-2 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SERPINB1 英文名稱: 絲酸蛋白酶抑制劑B1抗體 0.2ml
phospho-EGFR (Ser695) 英文名稱: 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
抑癌基因p16抗體 Anti-P16/CDKN2A 0.1ml
Anti-SOD2/FITC 熒光素超氧化物歧化酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NIPA(Ser354) 磷酸化間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-A Raf/ARAF A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh peripherin 外周蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Chromogranin A 嗜鉻素 1:300 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TNF beta 英文名稱: 壞死因子β抗體(TNFβ) 0.1ml
Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 英文名稱: 磷酸化細胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 0.1ml
Anti-A Raf/ARAF A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml