詳細介紹
雜交瘤細胞,;4.00E+10價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細胞名稱 雜交瘤細胞,;4.00E+10價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓,、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細胞生長曲線
Anti-HER3/ErbB3 /FITC 熒光素標記HER3受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-PGRN /FITC 熒光素標記顆粒蛋白前體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AX2R/LOC389289 膜粘連蛋白2受體抗體 規(guī)格 0.2ml
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) ??窠?jīng)毒素(35肽) 0.1mg
Gemin 1 英文名稱: 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格 0.1ml
Anti-PGRN /FITC 熒光素標記顆粒蛋白前體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NT(Human Neurotensin) ELISA Kit 人神經(jīng)降壓素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HA tag HA tag標簽單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MLF1 Interacting Protein/PBIP1/KLIP 卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit 人碳酸酐酶2 96T
ROS1 英文名稱: 活性氧簇ROS抗體 0.1ml
Claudin 2 英文名稱: 緊密連接蛋白2抗體 0.2ml
Anti-HA tag HA tag標簽單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Sidekick 2 英文名稱: 細胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 0.2ml
Engrailed 1 英文名稱: 同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體 0.2ml
壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 Anti-TRAF2 0.2ml
Anti-TP I /FITC 熒光素標記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB3(Tyr773) 磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格 0.1ml
BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat) 癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1) 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) 磷酸化A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Perilipin A 脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 規(guī)格 0.1ml
CEA 癌胚抗原 1:150 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TORC1 英文名稱: 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 0.2ml
Phospho-CBX5 (Tyr37) 英文名稱: 磷酸化CBX5抗體 0.2ml
Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) 磷酸化A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml