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詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞,；3B1A15價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱(chēng) 雜交瘤細(xì)胞；3B1A15價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏,，其特征特性尚未公開(kāi),。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-IGF-1 R/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長(zhǎng)因子-I受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PLASTIN3/T Plastin/FITC 熒光素標(biāo)記絲束蛋白T Plastin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARL8B ADP核糖基化樣因子8B抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗水貂IgG 0.1ml
GCNT3 英文名稱(chēng)： β1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移酶3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-MK IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-PLASTIN3/T Plastin/FITC 熒光素標(biāo)記絲束蛋白T Plastin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OFQ/N(Mouse orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 小鼠孤腓肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴(lài)性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGR3 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黃體激素 96T
MCL1 英文名稱(chēng)： 髓樣細(xì)胞白血病-1抗體 0.1ml
APC 英文名稱(chēng)： 腺瘤樣息肉抗體 0.1ml
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴(lài)性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SLC24A5 英文名稱(chēng)： 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體 0.1ml
EHHADH 英文名稱(chēng)： 三羥酰輔酶A脫氫酶抗體 0.2ml
RRAD抗體 Anti-RRAD 0.1ml
Anti-Phospho-TAK1 (Thr184)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MK1/MAPKK1(Ser298) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
apoA1 (Apolipoprotein/APOA1 protein )human 載脂蛋白A1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Cyclin C 周期素 C(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CCR-2A 細(xì)胞表面趨化因子受體2A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PBR/DBI/TSPO 外周苯二氮受體抗體 規(guī)格 0.1ml
CD7 Kit Human 人 CD7 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TTI1 英文名稱(chēng)： 轉(zhuǎn)錄因子相互作用蛋白1抗體 0.2ml
CTNNAL1 英文名稱(chēng)： 粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體 0.1ml
Anti-CCR-2A 細(xì)胞表面趨化因子受體2A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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