小鼠胚胎干細(xì)胞；LT04培養(yǎng)只能用于科研,，不得用于臨床,。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞,、正常細(xì)胞,、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,，飽滿,，光澤度好，*,，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),。歡迎廣大科研用戶！

細(xì)胞名稱  小鼠胚胎干細(xì)胞,；LT04培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1：

3傳代,，3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定

小鼠胚胎干細(xì)胞,；LT04培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮,、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-HCV-NS3/FITC 熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Paxillin/FITC 熒光素標(biāo)記樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BAGE2 /抗原2.2抗體 規(guī)格 0.2ml

5-HT(5-Hydroxy-L-tryptophan/L-5-HTP) 5-羥色胺 20mg

GBP2 英文名稱： G蛋白結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Paxillin/FITC 熒光素標(biāo)記樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ASK1(Ser1033) 磷酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Tubulin-alpha 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

UGP2 英文名稱： 尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗體 0.2ml

DNAJC7 英文名稱： DNAJC7蛋白抗體 0.2ml

Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
slides box 塑料切片盒 25片

CMD1G 英文名稱： 擴(kuò)張型心肌病蛋白1G抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh NR2C2/TAK1 孤兒核受體TAK1抗體 規(guī)格 0.1ml

ACE Human 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

C8orf37 英文名稱： 8號染色體開放閱讀框37抗體 0.2ml

Anti-CKLFSF2 趨化素樣因子超家族成員2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Anti-BRAF/FITC 熒光素標(biāo)記黑素瘤相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-gremlin/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CIKS 核因子NFκB激活蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

CD4(Rabbit Anti-Human Mouse rat CD4 Palyclonal Anti-body) CD4抗原 0.5mg

IgHV 英文名稱： 免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh *mt 線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-gremlin/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。