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小鼠雜交瘤細(xì)胞;3H5培養(yǎng)

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更新時間:2018-04-28 16:29:04瀏覽次數(shù):385

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

小鼠雜交瘤細(xì)胞;3H5培養(yǎng)只能用于科研,,不得用于臨床,。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞,、正常細(xì)胞,、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,,飽滿,,光澤度好,*,,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),。歡迎廣大科研用戶!

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞,;3H5培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

品牌 半貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1:

3傳代,,3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 陰性 

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定

小鼠雜交瘤細(xì)胞,;3H5培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),,按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進(jìn)行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細(xì)胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-GTP-CH-1/FITC 熒光素標(biāo)記三磷酸鳥苷環(huán)水解酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-PAR-1/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白酶激活受體-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Bcl2A1 BCL2相關(guān)蛋白A1抗體 規(guī)格 0.1ml

Cardiac Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T 0.5mg

GAS2L1 英文名稱: 生長停滯特異性蛋白2家族1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-PAR-1/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白酶激活受體-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲素受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-LAP18/Stathmin 白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LAIR-1/CD305 白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體 規(guī)格 0.2ml

GDNF ELISA Kit 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子 96T

PPP2R3A 英文名稱: 蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基3A抗體 0.2ml

CHD3 英文名稱: ATP依賴的解旋酶CHD3抗體 0.2ml

Anti-LAP18/Stathmin 白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Smad3 英文名稱: 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml

ENO1+ENO2+ENO3 英文名稱: 神經(jīng)元,,肌肉特異性烯醇化酶抗體 0.2ml

蛋白酪氨酸磷酸酶-1B/磷酸化酪氨酸抗體 Anti-PTP-1B/pTyr 0.1ml

Anti-phospho-Synapsin I (Ser553) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MK6 (Ser207) 磷酸化原活化蛋白激酶MKK6抗體 規(guī)格 0.1ml

HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TCF7L2(transcription factor 7-like 2) 轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-Brucella 布魯氏菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDZK4 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK4蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

CD30 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

TSARG6 英文名稱: 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體 0.1ml

CXCR2 英文名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 0.1ml

Anti-Brucella 布魯氏菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

 

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