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詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；HBMO-3培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
小鼠雜交瘤細(xì)胞,；HBMO-3培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時,，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
Anti-IGF-1R/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子-I受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PLG/FITC 熒光素標(biāo)記纖維蛋白溶酶原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARL3 ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗水貂IgG 0.3ml
GABA Transporter 2 英文名稱： γ基丁酸運載蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-MK IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-PLG/FITC 熒光素標(biāo)記纖維蛋白溶酶原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
P-CK(Human pan-cytokeratin) ELISA Kit 人廣譜細(xì)胞角蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-His tag 聚組氨酸抗體標(biāo)簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MEGF5/Slit3 復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格 0.2ml
NNE(Human non-neuronal enolase) ELISA Kit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶 96T
Reticulon 1 英文名稱： 神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白抗體 0.2ml
C1orf187 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框187抗體 0.2ml
Anti-His tag 聚組氨酸抗體標(biāo)簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
SP(Mouse Substance P) ELISA Kit 小鼠P物質(zhì) 96T
NEDD4 英文名稱： 神經(jīng)前體細(xì)胞發(fā)育下調(diào)蛋白4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Beta tubulin cofactor D 英文名稱： 微管蛋白β輔助因子D抗體 0.2ml
Anti-Synapsin II 神經(jīng)突觸素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-AGER/RAGE/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠磷酸化雌激素受體α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CPT2 肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶2抗體 規(guī)格 0.2ml
Cathepsin G/CTSG 組織蛋白酶G 0.5mg
phospho-KLF5(Ser275) 英文名稱： 磷酸化KLF5抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh UCHL1/PGP9.5 神經(jīng)細(xì)胞胞漿蛋白9.5抗體(蛋白基因產(chǎn)物9.5) 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠磷酸化雌激素受體α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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