詳細介紹
小鼠乳腺癌細胞,;4T1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。
細胞名稱 小鼠乳腺癌細胞,;4T1價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞由華中科技大學生命科學學院蘇莉教授提交保藏,4T1細胞可用于相關的基礎研究,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C9
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,,(根據(jù)經驗),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓,、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-HCMV PP65/HHV5 PP65/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒PP65/CMV低基質磷脂蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857)/FITC 熒光素標記磷酸化血小板源性生長因子受體α/β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BAP135/TFII I 蛋白酪氨酸激酶BAP135抗體 規(guī)格 0.2ml
PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 0.5mg
G protein alpha Inhibitor 2 英文名稱: G蛋白α抑制蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857)/FITC 熒光素標記磷酸化血小板源性生長因子受體α/β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PDH E1(Mouse pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA KIT 小鼠丙酮酸脫氫酶E1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD20/Biotin 生物素化CD20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E.coli O6 大腸桿菌埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6) 規(guī)格 0.2ml
ADV IgG 腺病毒 IgG 混合型(間接法二步法)
MAG1 英文名稱: 肺癌轉移相關蛋白抗體 0.2ml
AGEs 英文名稱: 晚期糖基化終末產物抗體 0.1ml
Anti-CD20/Biotin 生物素化CD20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Sphingomyelin Synthase 1 英文名稱: 鞘磷脂合成酶1抗體 0.2ml
EEF1D 英文名稱: 延伸因子EF-1δ抗體 0.2ml
促腎上腺皮質激素(1-39)抗體 Anti-ACTH 0.1ml
Anti-IL-17/RBITC(Interleukin-17) 羅丹明標記白細胞介素17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463) 磷酸化堿性成纖維細胞生長因子受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
CPT1A peptide 肉毒堿棕櫚?;D移酶1A多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
PROG ELISA kit 大鼠孕激素/孕酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ARHI/FITC 熒光素標記ARHI蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM13B1 FAM13B1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
CaN ELISA Kit 大鼠鈣調磷酸酶 96T
5 MethylCytosine 英文名稱: 5甲基胞嘧啶抗體 0.1ml
phospho-Androgen Receptor (Ser791) 英文名稱: 磷酸化雄激素受體抗體 0.1ml
Anti-ARHI/FITC 熒光素標記ARHI蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml