化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞,；HumanIgM培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 1957年，Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞,，CHO-K1是CHO的一個(gè)亞克隆,。CHO-K1的生長需要脯氨酸。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C8
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
小鼠雜交瘤細(xì)胞,；HumanIgM培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
Anti-OAT-1/FITC 熒光素標(biāo)記陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(抗大,、小鼠)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-bovine IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體 Anti-CD79A/IGBP-1 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗IgG 0.1ml
FUT1 英文名稱： 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PLB/phospholamban 心臟磷蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-bovine IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PF-3 ELISA Kit 大鼠血小板因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Aurora A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠,、,、兔、馬,、豬有絲分裂激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ezrin 埃茲蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Obestatin (Human Ghrelin/GHRP) ELISA Kit 人肥胖抑制素ELISA試劑盒 96T
MtTF1 英文名稱： 線粒體轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.2ml
ATG9B 英文名稱： 自噬相關(guān)蛋白9B抗體 0.2ml
Anti-Aurora A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠,、,、兔、馬,、豬有絲分裂激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
RET 英文名稱： 指狀蛋白RET抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAL T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 人封閉抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
CEAcam8 英文名稱： 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體 0.2ml
Anti-IGFBP4/IBP4 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
BMP-4 小鼠骨形成蛋白-4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FGF4 纖維母細(xì)胞生長因子4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
CA19-9(Human Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit 人糖鏈抗原19-9 96T
SH3BGRL2 英文名稱： SH3BGRL2蛋白抗體 0.1ml
IGSF16 英文名稱： 免疫球蛋白超家族成員16抗體 0.2ml
Anti-FGF4 纖維母細(xì)胞生長因子4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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