詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞,;16DC9-A價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞,;16DC9-A價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 細胞注射小鼠腹腔可產生高滴度的單抗,可用于基礎研究和臨床檢驗,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,,(根據經驗),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,,按公式計算出細胞數,。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,,繪制細胞生長曲線
Anti-phospho-ERK1(pThr202/pTyr204)/FITC 熒光素標記抗磷酸化原活化蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-FITC/Gold 金標記兔抗熒光素 (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
纖維母細胞生長因子受體1抗體 Anti-FGFR1 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/PE PE標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
FOXF2 英文名稱: 叉頭蛋白F2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Stathmin 1 (Ser63) 磷酸化原癌基因蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-FITC/Gold 金標記兔抗熒光素 (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
PIIICP 小鼠III型前膠原肽(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MKP-2/DUSP4 原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Msx2/Hox8 同源盒基因Msx2抗體 規(guī)格 0.2ml
CFD(Human complement factor D) ELISA Kit 人補體因子D 96T
SDCCAG16 英文名稱: 結腸癌抗原16抗體 0.2ml
CXCR3 英文名稱: 細胞表面趨化因子受體3抗體 0.1ml
Anti-MKP-2/DUSP4 原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
STIM1 英文名稱: 基質交感分子1抗體 0.2ml
phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594) 英文名稱: 磷酸化酪酸蛋白激酶受體B1+B2抗體 0.1ml
酪氨酸激酶C抗體 Anti-Trk C 0.2ml
Anti-TREM1/FITC 熒光素標記兔抗人,、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
BSEP peptide 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ACA(Mouse anti-centrol and centrosome antibody)ELISA Kit 小鼠抗中性粒/中心體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ocludin-5/FITC 熒光素標記緊密連接蛋白-5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DLL3 Notch信號通路Delta樣配體3抗體 規(guī)格 0.2ml
BSA/HRP 辣根過氧化物酶標記血清白蛋白 0.1ml
LC3A/B 英文名稱: 自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體 0.1ml
氯丙嗪檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產/蜂蜜/奶
Anti-ocludin-5/FITC 熒光素標記緊密連接蛋白-5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml