詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;16DC9價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞;16DC9價格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進(jìn)行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,,細(xì)胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),,按公式計算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-PPIG/FITC 熒光素標(biāo)記親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgG Whole serum 兔抗雞IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
胰島素樣生長因子-I受體抗體 Anti-IGF-1 R 0.1ml
chicken IgY 小鼠抗雞IgY抗體 1mg
Fox2 英文名稱: RNA結(jié)合蛋白9抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RACGAP1(Ser387) 磷酸化Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG Whole serum 兔抗雞IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit 人丙酮酸激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NIK/MAPKKK14 NFkB誘導(dǎo)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-16 白介素16抗體 規(guī)格 0.1ml
6-K-PG(Mouse 6-keto-prostaglandin) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素 96T
phospho-PAK6(Ser165) 英文名稱: 磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6 0.1ml
CPT1A 英文名稱: 肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A抗體 0.1ml
Anti-NIK/MAPKKK14 NFkB誘導(dǎo)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
sTLR6 ELISA Kit 大鼠可溶性Toll樣受體6 96T
phospho-MEF2D(Ser180) 英文名稱: 磷酸化肌細(xì)胞特異性增強(qiáng)因子2D抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh FBP1 果糖1,6-二磷酸酯酶抗體 規(guī)格 0.2ml
MMP-13 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
AKR1C2 英文名稱: 膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體 0.2ml
Anti-ALK/CD246(phospho Tyr1604) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NAP 小鼠中性粒細(xì)胞活化肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
BrdU(Human Bromodeoxyuridine) ELISA Kit 人溴脫氧核苷尿嘧啶 96T
SNX4 英文名稱: 分選連接蛋白4抗體 0.2ml
CEE 英文名稱: 跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體 0.2ml
Anti-Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml