細胞名稱  小鼠肉瘤細胞,；CCRFS-180培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 S-180細胞建于1959年（Foleg，G,，et al）,。該細胞系保持了肉瘤的腫瘤原性，可用于腫瘤發(fā)生機理的體內(nèi)外研究,。在體外,，廣泛用于腫瘤花療法的篩選試驗（Cancer chemotherapy screening test）。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳
小鼠肉瘤細胞,；CCRFS-180培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次,，細胞長至60%～70%融合時,，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮,、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,，待細胞變圓、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時隨機取出3瓶細胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％,，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-NPM (Thr95)/FITC 熒光素標記磷酸化核仁磷酸蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-HBeAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CC趨化因子受體3抗體 Anti-CCR-3 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/Cy7 Cy7標記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

FNDC8 英文名稱： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-HBeAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PL-A2 ELISA Kit 大鼠磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 熒光素標記磷酸化熱休克蛋白27抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FRA2/FOSL2 FRA2/FOSL2抗體 規(guī)格 0.1ml

BMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白6 96T

Neuronal thread protein AD7c-NTP 英文名稱： 神經(jīng)絲蛋白抗體 0.2ml

ASB9 英文名稱： 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體 0.2ml

Anti-Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 熒光素標記磷酸化熱休克蛋白27抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Streptavidin/Gold 金標記鏈霉親和素(10nm/15nm) 0.5ml

LGI3 英文名稱： Lgi3蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh DKK1 抑癌蛋白DKK1抗體 規(guī)格 0.2ml

CETP(Mouse cholest erolester transfer protein)ELISA Kit 小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

芐青霉素檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產(chǎn)/蜂蜜/奶

Anti-CLEC-2/CLEC1B/FITC 熒光素標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CTX(Human Cyclophosphamide) ELISA Kit 人環(huán)磷酰胺Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Melan-A/MART-1/Melanoma HMB45 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh ITPR2 5-三磷酸肌醇受體2抗體 規(guī)格 0.2ml

BP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit 人大皰性類天皰瘡抗體 96T

PP4R3B 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白磷酸酶3B抗體 0.2ml

C22orf26 英文名稱： 22號染色體開放閱讀框26抗體 0.2ml

Anti-Melan-A/MART-1/Melanoma HMB45 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。