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詳細(xì)介紹
小鼠前胃癌細(xì)胞,；MFC價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱 小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC價(jià)格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 源自615小鼠。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%
傳代方法 消化3-5分鐘,。1：
2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿,。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮,、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻,，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率,。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-Mtp53/FITC 熒光素標(biāo)記突變型P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/Biotin 生物素化羊抗雞IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
抗Ⅹ型膠原抗體 Anti-CollagenⅩ 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
FLRT2 英文名稱： 富含亮酸跨膜纖連蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PIBF1/C13orf24 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體 規(guī)格 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/Biotin 生物素化羊抗雞IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PLAUR/uPAR ELISA Kit 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Anthrax/FITC 熒光素標(biāo)記抗體(采用活疫苗制備)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM89B/MMTV-R 病毒受體同源蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
sE-selectin(Human soluble E-selectin) ELISA Kit 人可溶性E選擇素 96T
phospho-MAP4K4(Ser631) 英文名稱： 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 0.1ml
ACVRL1 英文名稱： 激活素受體樣激酶1抗體 0.2ml
Anti-Anthrax/FITC 熒光素標(biāo)記抗體(采用活疫苗制備)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SULT2B1 Kit Human 人 SULT2B1 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TFF1 英文名稱： 癌雌激素誘導(dǎo)蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ORP150 氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體 規(guī)格 0.2ml
TSLP(Thymic stromal lymphopoietin isoform 1) 淋巴細(xì)胞生成素-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CPXCR1 英文名稱： /抗原77抗體 0.2ml
Anti-CD335/NKp46/NCR1 細(xì)胞毒性受體NK-p46抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CAM-ab(Human anti-calmodulin specific antibody) ELISA Kit 人抗鈣調(diào)素特異抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) 磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mammaglobin A 珠蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1A 96T
RAB40A 英文名稱： RAS癌基因家族蛋白R(shí)AB40A抗體 0.2ml
phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 英文名稱： 磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體 0.1ml
Anti-phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) 磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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