細胞名稱  小鼠雜交瘤細胞；PK136培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 雜交瘤細胞系PK136分泌一種小鼠單克隆抗體（IgG2a）,，此抗體與小鼠NK細胞起反應,。 該細胞系由SP2/0-Ag14骨髓瘤和用CE小鼠脾細胞和骨髓細胞免疫的（C3H X BALB/C）F1小鼠的脾細胞融合而成。 此抗體對NK特異且在有補體時有細胞毒作用。 此抗體與不同小鼠株的細胞的反應方式,，與常規(guī)的NK1.1抗血清的反應方式相符,。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS

傳代方法 1：

2。3天內可長滿,。  

傳代情況 P
小鼠雜交瘤細胞,；PK136培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次,，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞,，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％,，計算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液,，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進行消化,，(根據(jù)經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。
Anti-phospho-STAT1(pThr701)/FITC 熒光素標記抗磷酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-human IgM 小鼠抗人IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

G蛋白偶聯(lián)受體-2抗體 Anti-GASR 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/Bio 生物素標記的驢抗兔IgG 0.1ml

FKBP25 英文名稱： 肽基脯酸異構酶酶FKBP25抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-SMC1 (Ser360) 磷酸化染色體結構維持蛋白質1抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-human IgM 小鼠抗人IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
PP ELISA Kit 大鼠胃蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Transferrin 轉鐵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh GIMAP8 GTP酶IMAP家族成員8抗體 規(guī)格 0.2ml

Orexin A(Human Orexin A) ELISA Kit 人阿立新A 96T

Nuclear Pore Complex Proteins 英文名稱： 核孔復合體蛋白抗體 0.2ml

Alpha-Synuclein 英文名稱： 核突觸蛋白抗體 0.1ml

Anti-Transferrin 轉鐵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Synapsin II 英文名稱： 神經突觸素2抗體 0.2ml

ESYT1 英文名稱： 延伸突觸蛋白1抗體 0.2ml

軸索過度生長抑制因子-B抗體 Anti-Nogo-B 0.2ml

Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) /FITC 熒光素標記磷酸化沉默調節(jié)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-P53(Thr18) 磷酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml

Bax peptide Bax(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠葉酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CDK6/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

BLC-1/CXCL13(Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1) ELISA Kit 人B-淋巴細胞趨化因子 96T

Manic Fringe 英文名稱： 狂躁基因同源蛋白MFNG抗體 0.2ml

Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78) 英文名稱： 磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體 0.1ml

Anti-CDK6/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml