細胞名稱  小鼠纖維肉瘤細胞,；WEHI-13VAR培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣

品牌 貼壁及懸浮生長

特征特性 在放線菌素D存在下對TNF敏感

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 新生牛血清，10%

傳代方法 1：4-1：6

傳代情況

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR

同工酶

染色體

使用權限 A類

小鼠纖維肉瘤細胞,；WEHI-13VAR培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化,，(根據經驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱,，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時,，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻，吸管分裝混合液,，傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數,。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液,，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時隨機取出3瓶細胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,，繪制細胞生長曲線
Anti-PERK/FITC 熒光素標記蛋白激酶R樣內質網激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/Gold 金標記羊抗大鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

內皮素-1抗體 Anti-ET-1 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml

FGFR5 英文名稱： 成纖維細胞生長因子受體5抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser199) 磷酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/Gold 金標記羊抗大鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
PROG(Mouse Progesterone)ELISA Kit 小鼠孕激素/孕酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Collagen VI /FITC 熒光素標記抗Ⅵ型膠原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DFFB DNA斷裂因子抗體(蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶) 規(guī)格 0.2ml

Goat IgG 羊IgG 10mg

LRP6 英文名稱： 低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體 0.2ml

氟苯尼考胺檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產/蜂蜜

Anti-Collagen VI /FITC 熒光素標記抗Ⅵ型膠原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

T4 Polynucleotide Kinase T4 DNA 激酶 1000 ul(1000次反應)

TIMP-1(NT) 英文名稱： 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端) 0.1ml

Rhesus antibody Rh NTCP/SLC10A1 鈉離子/磺膽酸共轉運蛋白 規(guī)格 0.1ml

PINP 人I型前膠原肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

C8orf86 英文名稱： 8號染色體開放閱讀框86抗體 0.2ml

Anti-phospho-c-Jun (Ser243) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit 人谷胱甘肽S轉移酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-GLUR3/GRIA 3 谷氨酸受體3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IGFBP6 胰島素樣生長因子結合蛋白6抗體 規(guī)格 0.2ml

Beta-TG ELISA Kit 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 96T

phospho-PTPRA (Ser180) 英文名稱： 磷酸化酪酸磷酸酶α抗體 0.1ml

Chondrocalcin 英文名稱： Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體 0.1ml

Anti-GLUR3/GRIA 3 谷氨酸受體3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。