詳細介紹
細胞名稱 人類結腸癌細胞系;DXH-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
人類結腸癌細胞系,;DXH-1培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,,按公式計算出細胞數,。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化,、計數已貼壁細胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,,計數每孔細胞的數目并計算平均值,。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,(根據經驗),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。
Anti-PNK1/PNKP/FITC 熒光素標記多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM 兔抗小鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
葡萄糖調節(jié)蛋白78抗體 Anti-GRP78 0.2ml
Dog IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM161B 英文名稱: FAM161B蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) 磷酸化S6核糖體蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgM 兔抗小鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
SCL70/topo I (Human anti-scl70 antibody) ELISA Kit 人抗硬皮病抗體70Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Integrin beta 5 整合素β5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LIPK 脂肪酶家庭成員K抗體 規(guī)格 0.2ml
fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人游離前列腺特異性抗原 96T
RNF146 英文名稱: 環(huán)指蛋白146抗體 0.2ml
CWF19L1 英文名稱: CWF19L1蛋白抗體 0.2ml
Anti-Integrin beta 5 整合素β5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Tn-T(Human Troponin T) ELISA Kit 人肌鈣蛋白T 96T
RNF157 英文名稱: 環(huán)指蛋白157抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗IgG 規(guī)格 0.1ml
MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
C1GALT1 英文名稱: N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3,、β-半乳糖轉移酶1抗體 0.2ml
Anti-Glycodelin A/PP14 胎盤蛋白14抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NN-T4(Human Neonatal Thyroxine) ELISA Kit 人新生甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF4A 沉默驅動蛋白KIF4A抗體 規(guī)格 0.2ml
ASD ELISA Kit 大鼠雄 96T
PHLP 英文名稱: 抑制基因PHLPP抗體 0.2ml
phospho-c-Abl(Tyr283) 英文名稱: 磷酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml