詳細(xì)介紹
人神經(jīng)瘤細(xì)胞,;751-NA價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱(chēng) 人神經(jīng)瘤細(xì)胞;751-NA價(jià)格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏,,其特征特性尚未公開(kāi),。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),,晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮,、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細(xì)胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),,按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率,。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-omerase Binding Protein,,P23/FITC 熒光素標(biāo)記端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
M2-PK ( pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體抗體 Shiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli] 0.2ml
phospho-STAT6 (Tyr641) 英文名稱(chēng): 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 0.1ml
EYA4 英文名稱(chēng): EYA4蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-M-CSF Receptor(Tyr809) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
M2-PK ( pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
sm Actinin- Alpha ELISA Kit 大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-5-HT/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記5-羥色胺抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Follistatin 卵泡抑素抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-4(Human Interleukin 4) ELISA KIT 人白介素4 96T
MAGEB3 英文名稱(chēng): 黑色素瘤相關(guān)抗原B3抗體 0.2ml
ADAM19 英文名稱(chēng): 去整合素樣金屬蛋白酶19抗體 0.2ml
Anti-5-HT/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記5-羥色胺抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TrK A.B.C 神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原) 0.5mg
Hsp93 英文名稱(chēng): 植物熱休克蛋白93抗體 1ml
Rhesus antibody Rh C1QL2/C1QTNF10 補(bǔ)體C1q和壞死因子相關(guān)蛋白10 規(guī)格 0.2ml
Anti-EPEC/E.coli /HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗腸致病性大腸桿菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ryanodine Receptor 心肌蘭尼堿受體抗體(腦肌蘭尼堿受體) 規(guī)格 0.2ml
Anti-CITED1/ABCC1/FITC 熒光素標(biāo)記結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rat Caspase-2 大鼠Caspase-2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-E.coli O139 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mucin 4/Muc4 粘蛋白-4抗體 規(guī)格 0.1ml
APC(Human activated protein C) ELISA Kit 人活化蛋白C 96T
phospho-SHC (Tyr239 + Tyr240) 英文名稱(chēng): 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
Caspase 5 英文名稱(chēng): 半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗體 0.1ml
Anti-E.coli O139 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml