詳細介紹
人急性淋巴白血病細胞,;Kasumi-1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人急性淋巴白血病細胞,;Kasumi-1價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞由華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院免疫系龔非力教授交換保藏,。Kasumi-1細胞且有人急性淋巴白血病細胞的典型特征,是研究人急性淋巴白血病的材料,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
POMC(Human pro-opiomelanocortin) ELISA Kit 人阿黑皮素原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PKB/AKT-1 蛋白激酶B(小鼠來源抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HIP2 泛素蛋白連接酶E2抗體 規(guī)格 0.2ml
ANG- I R(Human angiotension I receptor Antibody) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅰ受體抗體 96T
EV71 polyprotein VP1 英文名稱: 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.2ml
CD34 英文名稱: CD34抗體 0.1ml
Anti-PKB/AKT-1 蛋白激酶B(小鼠來源抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NT-4/NT-5 神經(jīng)生長因子4/5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFN-Alpha/IFNA1/IFNA13/Interferon alpha 1 干擾素α抗體 規(guī)格 0.1ml
CA(Mouse catecholamine)ELISA Kit 小鼠兒茶酚胺 96T
Prion protein PrP/CD230 英文名稱: 朊病毒蛋白CD230抗體 0.2ml
CERKL 英文名稱: 視網(wǎng)膜色素變性蛋白26抗體 0.2ml
Anti-NT-4/NT-5 神經(jīng)生長因子4/5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
TSGF ELISA Kit 大鼠特異生長因子/相關(guān)因子 96T
Nm23-H2 英文名稱: 抑制基因抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh GDPD5 甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域5抗體 規(guī)格 0.2ml
FA ELISA Kit 大鼠葉酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
AQP0 英文名稱: 水通道蛋白0抗體 0.1ml
Anti-Tubb3 微管蛋白β3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HSP-90(Mouse Heat Shock Protein 90) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白90Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD107a/LAMP-1/PE 熒光素PE標記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/FITC FITC標記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.3ml
Anti-TG 甲狀腺球蛋白抗體(TG抗體) 96T
MCG10 英文名稱: RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體 0.2ml
ABHD13 英文名稱: 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 0.2ml
Anti-CD107a/LAMP-1/PE 熒光素PE標記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml