細胞名稱  人子宮頸鱗狀細胞癌細胞,；SiHa培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞來源于一位日本病人的手術(shù)切除的腫瘤組織。電鏡下可以看到細胞間典型的橋粒和細胞質(zhì)中大量的張力絲,。1975年發(fā)現(xiàn)有支原體污染,，而后被去除。該細胞整合有HPV16基因組,，每個細胞中有1~2個拷貝,。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C36

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR STR鑒定

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
人子宮頸鱗狀細胞癌細胞；SiHa培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗),，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細胞基本成單個懸浮,，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次,，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻，吸管分裝混合液,，傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),，按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％,，計算貼壁率,。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,，繪制細胞生長曲線
Anti-TIMP-1/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體 Anti-SYK 0.1ml

STK38 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶38抗體 0.2ml

ET-1 英文名稱： 內(nèi)皮素1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白細胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
SP-C(Human Pulmonary surfatcant-associated protein C) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HPV18 E6 人類狀瘤病毒18 E6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MCG10 RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體 規(guī)格 0.2ml

ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合素連接激酶1 96T

RHCG 英文名稱： RH血型C糖蛋白抗體 0.2ml

Collagen I 英文名稱： Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體 0.1ml

Anti-HPV18 E6 人類狀瘤病毒18 E6抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

T-TM(Human thrombinthrombomodulin compound) ELISA Kit 人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物 96T

FHOD3 英文名稱： FHOD3蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh NADE/NGFRAP1 神經(jīng)生長因子受體相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Ret MMP-9 大鼠血清金屬基質(zhì)蛋白酶-9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

CCR6 英文名稱： 細胞表面趨化因子受體6抗體 0.1ml

Anti-EAAT3 膠質(zhì)細胞谷氨酸運載蛋白3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit 人抗著絲點抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體 規(guī)格 0.2ml

ANP(Mouse Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 小鼠心鈉肽 96T

PHD1 英文名稱： 脯酰羥化酶抗體 0.1ml

Casein Kappa 英文名稱： K-酪蛋白抗體 0.1ml

Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。