詳細介紹
人前列腺上皮細胞,;RWPE-1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細胞名稱 人前列腺上皮細胞,;RWPE-1價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞1996年由Webber MM建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁,、懸浮,、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細胞生長曲線
Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit 人復(fù)制蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SUZ12/CHET9 胚胎干細胞抑制蛋白Suz12抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
GRO Alpha/CXCL1/MGSA(Human growth-regulated oncogene Alpha/melanoma growth stimulating activity) ELISA Kit 人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子 96T
ARHGAP17 英文名稱: 神經(jīng)細胞發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 0.2ml
BTD 英文名稱: 生物素酶抗體 0.2ml
Anti-SUZ12/CHET9 胚胎干細胞抑制蛋白Suz12抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Vimentin 波形蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-KLRF1/NKp80 細胞毒性受體NK-p80抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh OPN/BSP 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人 規(guī)格 0.1ml
ICOSLG Kit Human 人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG ELISA配對抗體 ELISA
TNFAIP8 英文名稱: 壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體 0.2ml
Calpastatin 英文名稱: 鈣蛋白酶抑制蛋白抗體 0.1ml
Anti-KLRF1/NKp80 細胞毒性受體NK-p80抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人透明質(zhì)酸酶2(Hyal-2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)ELISA試劑盒,英文名:COMT ELISA Kit人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠含IQ基元GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)ELISA試劑盒,,英文名:IQGAP1 ELISA Kit人不均一核核糖核蛋白K(HNRPK)ELISA試劑盒人96T39-2500 pg/mL小鼠膽囊收素A受體(CCKAR)ELISA試劑盒,,英文名:CCKAR ELISA Kit人干擾素α/β受體2(IFNAR2)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA試劑盒,英文名:VCC1 ELISA Kit人KiSS-1受體(KiSS-1R) ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)ELISA試劑盒,,英文名:INPP4A ELISA Kit人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA試劑盒,,英文名:DMP1 ELISA Kit人乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒,英文名:GP-II ELISA Kit
人干擾素γ誘導(dǎo)蛋白16(IFI16)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白介素17B(IL17B)ELISA試劑盒,,英文名:IL17B ELISA Kit人非肌性肌球蛋白重鏈9(MYH9)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1)ELISA試劑盒,,英文名:UGT1 ELISA Kit人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒,英文名:GDNF ELISA Kit人外周髓鞘蛋白22(PMP-22)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒,,英文名:MBP/MBL ELISA Kit人抑制因子(Elafin)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒,,英文名:IL-4 ELISA Kit人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒,英文名:Bid ELISA Kit人蔗糖轉(zhuǎn)運因子SWEET1(SWEET1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠孕烷X受體(PXR)ELISA試劑盒,,英文名:PXR ELISA Kit
兔抗豬IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
Wnt11 英文名稱: 信號通路Wnt11抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CHEK1 (Ser280) 磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 熱休克蛋白90α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Phospho-Doublecortin (Ser128) 英文名稱: 磷酸化雙皮質(zhì)素抗體 0.1ml
Anti-phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-Slc4a7/Nbcn1 /FITC 熒光素標(biāo)記碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
NADPH氧化酶4抗體 Anti-Nox-4/NADH 0.1ml
2,4-D 英文名稱: 2,,4-二氯苯氧乙酸(除草劑)抗體 0.2ml
CHKL 英文名稱: 乙醇胺激酶β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser392) 磷酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml
AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg