人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL1培養(yǎng)只能用于科研,，不得用于臨床,。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞,、正常細(xì)胞,、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,，飽滿(mǎn),，光澤度好,，*，專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo),。歡迎廣大科研用戶(hù)！

細(xì)胞名稱(chēng)  人胚肺成纖維細(xì)胞,；HFL1培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞為穩(wěn)定二倍體細(xì)胞,。

培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS

傳代方法 1:4-1:6，每周換液2-3次

傳代情況 P16

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

支原體檢測(cè)

STR Amelogenin:X,；CSF1PO:10,；D13S317:8；D16S539:9,11,；D18S51:15,；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17,；D5S818:11,12,；D7S820:11；D8S1179:12,14,；FGA:21,24,；PentaD:9,14；PentaE:21,；TH01:6,9,；TPOX:8；vWA:16

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

人胚肺成纖維細(xì)胞,；HFL1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）,。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次,，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒phospho-APG4B(Ser309)

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)免疫試劑盒AFAP

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒ADORA1

豬胰島素(INS)免疫試劑盒ARSB

豬一氧化氮(NO)免疫試劑盒A2BP1

豬氧還原蛋白過(guò)氧化物酶2(PRDX2)免疫試劑盒ADAM17

豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒ARNT2 

豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)免疫試劑盒ABH8

豬血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒ABI3BP

豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒ARHGAP20

豬血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒ASB10

豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒ALDH1L1

豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒Axin 2

豬血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒AMH

豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒EphA8

豬血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒Acetoacetyl-CoA synthetase

豬血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒ARNTL2

豬血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒phospho-AANAT (Thr29)