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鴨病毒性肝炎（DVh）ELISA試劑盒操作步驟

編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔,、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。 
溫育：操作同3,。
洗滌：操作同5,。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
計算和結(jié)果判定：

  試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

  臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

  陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為鴨病毒性肝炎（DVh）陰性

  陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為鴨病毒性肝炎（DVh）陽性
鴨病毒性肝炎（DVh）ELISA試劑盒注意事項

1．操作嚴格按照說明書進行,，本試劑不同批號組分不得混用。

2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

5．底物請避光保存。

6．試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm

7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸,，使用時必須注意安全。

鴨病毒性肝炎（DVh）ELISA試劑盒保存條件及有效期

1．試劑盒保存：,；2-8℃,。

2．有效期：6個月