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大鼠GATA結合蛋白4（GATA4）ELISA試劑盒洗滌方法：

1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次,。

2. 手工洗板：甩盡孔內液體，在潔凈的吸水紙上拍干,，每孔加洗滌液350μl,，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,，在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次。

實驗開始前,，各試劑均應平衡至室溫,；試劑或樣品配制時,，均需充分混勻，并盡量避免起泡,。

1.加樣：分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡,，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時,。為保證實驗結果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,，甩干,，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制)，酶標板加上覆膜,，37℃溫育1小時,。

3.棄去孔內液體，甩干,，洗板 3次,，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔,，甩并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干,。

干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl，加上覆膜,，37℃溫育1小時,。

5.棄去孔內液體，甩干,，洗板5次,，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,，即可終止),。

7.每孔加終止液50μl,，終止反應，此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,，預熱儀器,，設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束,。