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技術(shù)文章

浣熊痘病毒PCR試劑盒使用方法

閱讀:377          發(fā)布時間:2022-3-7

浣熊痘病毒PCR試劑盒使用方法:

注:浣熊痘病毒PCR試劑盒功能所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,,6,000rpm離心數(shù)秒后使用,。

1. 樣本處理(樣本處理區(qū))

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,,具體提取方法請參照相關(guān)說明書,;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,,可直接使用。

2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))

取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl,、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液,、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管),。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū),。

2.加樣(樣本處理區(qū))

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,,蓋緊管蓋,,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū),。

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