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非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,，然后在di一,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻,；然后從di一孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,，混勻；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為180 ng/L,，120 ng/L ，60 ng/L,，30 ng/,，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）,、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同3,。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘,。

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE)

小鼠雄激素結(jié)合蛋白(mouse ABP)

小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(mouse ACTH)

小鼠Active Caspase-3

小鼠Active Caspase-7

小鼠Active Caspase-8

小鼠激活素A(mouse Activin A)

小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin)

小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA)

小鼠抗核抗體(mouse ANA)

小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4)

小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A)

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2)

小鼠腦鈉肽(mouse BNP)

小鼠N端前腦鈉素(mouse NT-proBNP)

小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)

小鼠CXCL3(mouse CXCL-3)

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)

小鼠皮質(zhì)酮(mouse Corticosterone)

小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2)

小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(mouse CTGF)

小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (mouse CTLA-4)

小鼠細(xì)胞色素P450(mouse Cytochrome P450)

小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)

小鼠CXCL1/KC(mouse KC)