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小鼠補體片段3d(C3d)ELISA試劑盒樣本處理及要求
閱讀:134 發(fā)布時間:2020-5-28小鼠補體片段3d(C3d)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測,。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或將上清置于-20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,,因此溶血標本不宜進行此項檢測,。