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人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要
閱讀:144 發(fā)布時間:2020-5-14人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要:
1.實驗前標準品,、試劑及樣本的準備;
2.加樣(標準品及樣本)50μL,,37℃孵育30分鐘,;
3.洗板5次,加酶標試劑50ul,,37℃孵育半小時,;
4.洗板5次;加入顯色液A,,B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
5.加終止液50μL,,立即450nm讀數(shù)。
6.計算
結(jié)果判斷:
1.每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,,如設(shè)置復孔,,則應(yīng)取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,,繪出標準曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標,,標準品的濃度為縱坐標,,繪出標準曲線。
2.推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,,如curve expert 1.3或1.4,,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,,乘以稀釋倍數(shù),;亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度。
3.若樣品OD值高于標準曲線上限,,應(yīng)適當稀釋后重測,,計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。