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關豬組織因子（TF）酶聯免疫試劑盒HIV測定過程
閱讀：391 發(fā)布時間：2020-4-22豬組織因子（TF）酶聯免疫試劑盒HIV測定過程：
1 配液：豬組織因子（TF）酶聯免疫試劑盒將50ml濃縮洗刷液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用,。
2 編號：將樣品對應微孔按序編號，每板設陰性對照3孔,、陽性對照Ⅰ型,、Ⅱ型各1孔,，空白對照1孔。
3 加樣：分別在相應孔加入待檢標本,、陰性,、陽性對照100μl，用封板膜封板后置37℃溫育30min,。
4 洗刷：當心把封板膜揭去,，用洗板機挑選5次程序，洗板后拍干,。
5 加酶：每孔加酶結合物100μl（空白對照孔除外）,，充沛混勻，用封板膜封板后置37℃溫育30min,。
6 洗刷：當心把封板膜揭去,，用洗板機挑選5次程序，洗板后拍干,。
7 顯色：每孔加入顯色劑A液和B液各50μl,，悄悄振動混勻,，封板后置37℃避光顯色15min,。
8 測定：每孔加終止液50μl，悄悄振動混勻,。設定酶標儀波長為450nm（建議使用雙波長的酶標儀比色,，參閱波長630 nm），空白調零,，讀取各孔OD值,。
9 判斷成果：核算臨界值（cut-off）（CO）值。 臨界值＝陰性對照A均值＋0.12 正常情況下,，陰性對照孔的OD值≤0.10（若1孔陰性對照的OD值＞0.1應放棄,，若有2孔或2孔以上陰性對照的OD值＞0.1，應重復實驗,。）,。樣品OD值＜臨界值者為HIV抗體陰性。
正常情況下,，陽性對照孔的OD值≥0.80（若1孔陽性對照的OD值＜0.8應放棄,，若有2孔或2孔以上陽性對照的OD值＜0.8，應重復實驗,。樣品OD值≥臨界值者為HIV抗體陽性,。
ELISA試劑盒注意：關于篩查陽性標本，應從頭取樣雙孔復試,，復試陽性者應按照《全國HIV檢測管理規(guī)范》送HIV確證實驗室進行確證實驗,。 質量操控： 每塊板設陰陽性及空白對照,，并于每次實驗用克己質控血清作質控，將質控血清孔OD值采用“即刻法"核算或標在質控圖上,，如質控有效,，標明實驗牢靠；如失控,，則要查看試劑效期,、貯藏溫度、試 驗溫度是否正常,、操作過程是否正確,，直至從頭實驗使其在控。